BAÑO DE MARIA

El baño María o baño de María es un método empleado en las industrias (farmacéutica,cosmética, de alimentos y conservas), en laboratorio de química y en la cocina, para conferir temperatura uniforme a una sustancia líquida o sólida o para calentarla lentamente, sumergiendo el recipiente que la contiene en otro mayor con agua u otro líquido que se lleva a o está en ebullición.

Para calentar al baño María hay que introducir un recipiente pequeño en el que se deposita la sustancia dentro de otro más grande que contiene un líquido y calentar este ´por su base. De este modo, se calienta en primer lugar el líquido contenido en el recipiente de mayor tamaño y esté va calentando gradualmente el contenido del recipiente menor, de un modo suave y constante. Es indispensable que en todo tiempo el recipiente interior (más pequeño) esté en contacto con el líquido para que se produzca la transmisión de calor.

La profesora nos asigno una actividad la cual consiste en poner a calentar clara de huevo y esto fue lo que realizamos:

Materiales:

• Clara de huevo 
• Tubos de ensayo 
• Baño María
• Pipeta

Procedimiento:

1. En un platito ponemos las claras de huevo 
2. Con una pipeta extraemos la clara y los ponemos en los tubos de ensayo
3. Cada tubo lo ponemos en la bandeja difusora 
4. Se mete la bandeja 
5. Se enciende el baño María y se pone la temperatura a 37°C 
6. Se coloca un termómetro con un corcho 
7. Esperamos 24 horas y lo observamos 

Fig.2. Agarramos la clara de huevo con la pipeta 

Fig.3. Metemos la clara de huevo en los tubos de ensayo

Fig. 4. Ponemos los tubos en la bandeja difusora

Fig.5 ponemos la bandeja difusora en el baño María

Fig. 6. Encendemos el baño María y lo ponemos a 37°C

Fig. 7 Ponemos el termómetro 

ESTERILIZACION (AUTOCLAVE Y ESTUFA DE SECADO)

Se denomina esterilización al proceso validado por medio del cual se obtiene un producto libre de microorganismos viables. El proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo de modo de asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un desafío más resistente.
Preferencia del PH de las bacterias
La esterilización se hace por vía seca o por vía húmeda:
Vía seca: Esta se efectúa en el horno por 2 horas a 180°C el material que esteriliza es el vidrio y los metales
Vía húmeda: En esta se utiliza el autoclave durante 15 minutos a 121°C No se puede recolectar la temperatura pero si la presión atmosférica, así que la presión atmosférica a la que debe estar es a una atmósfera de presión, los materiales que esteriliza son el vidrio y medios de cultivo.
Material:

• Algodón
• Cinta de testigo
• Papel estraza 
• Caja de petri
• Tubos de ensayo
• Matraz Erlenmeyer 
• Manta de cielo

Procedimiento para preparar el material para esterilización por vía húmeda:

1. Preparamos el matraz y hacer un tapón con una manta de cielo
2. Hacer un tipo barco de papel estraza y lo ponemos arriba de el tapón y lo fijamos con cinta testigo
3. Preparar el autoclave
4. Sacar la camisa o el barril donde se meten los materiales a esterilizar 
5. Llenar el autoclave de agua hasta la marca roja
6. Verificar las condiciones de la camisa con los materiales
7. Introducir la camisa con los materiales 
8. Cerrar la tapa en forma de cruz para evitar accidentes
9. Verificar que este cerrada la válvula de escape 
10. Conectar y encender ha máxima potencia 
11. Esperar que la aguja del manómetro llegue a 1 atmósfera
12. cuando llegue a 1 atmósfera esperar los 15 minutos regular la válvula de escape verificando que la aguja siempre este en 1 atmósfera
13. Una ves pasado los 15 minutos se abre en su totalidad la válvula de escape para dejar salir el vapor del gas. 
14. Apagar y desconectar
15. Abrir en forma de cruz y levantar la tapa por la parte de atrás para que el vapor no nos queme 
16. Sacar el cilindro o la camisa con maniguetas 
17. Abrir la llave para que salga el agua 
18. Lavar con agua destilada todo
19. Secar completamente
20. Cerrar la llave, ingresar la camisa y cerrar la tapa
21. Poner una funda para protegerla

Procedimiento para preparar el material para esterilización por vía seca:

1. Se envuelve la caja de petril con papel estraza como si estuviéramos envolviendo la tortilla 
2. los tubos también se envuelven Recortando una tira larga de papel estraza tomamos un pedazo de algodón para ponerlo como tapón para el tubo
3. empezar a envolver el tubo con el papel desde arriba donde se encuentra el tapón hasta abajo y cellar con una pequeña cantidad de cinta testigo

MICROSCOPIA.

MICROSCOPIO

El microscopio (del griego micrós, ‘pequeño’, y scopéo, ‘mirar’) es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos o más lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopia

PARTES DEL MICROSCOPIO:

• Oculares: Están colocados en la parte superior del tubo, su función es la de captar y ampliar la imagen formada en los objetivos.
• Tubo: Es una cámara obscura unida al brazo mediante una cremallera.
• Brazo: Es una columna perpendicular al pie. puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo
• Objetivos: Están colocados en la parte inferior del tubo insertadas en una pieza metálica denominada revolver que permite cambiarlos fácilmente. Generan una imagen real, invertida y aumenteada
• Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo
• Pinzas: Se encuentran en la platina y sirven para retener el porta objetos sobre la platina
• Tornillos de desplazamiento: permite mover la preparación de adelante hacia atrás o de izquierda a derecha 
• Nonius: Permite fijar las coordenadas de cualquier campo óptico
•  condensador:Es un sistema de lentes situado debajo de la platina su función es concentrar la luz generada por la fuente de iluminación hacia la preparación
• Diafragma iris: Su función es limitas los rayos que atraviesan el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados.
• Fuente de iluminación: Se trata de una lampara alógena de intensidad graduable. Esta situada en el pie del microscopio
• Pie: Sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En el se integra la fuente luminosa.
• Tornillo macrométrico y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rapida y el micrométrico de forma lenta.

MANEJO DEL MICROSCOPIO.

ENFOQUE

1. Colocamos el preparado en la platina 
2. Conectamos el microscopio 
3. Observamos que la luz este al mínimo
4. Encendemos el microscopio 
5. Colocamos el preparado en la platina
6. Encendemos el reostato
7. Movemos la platina 
8. Colocamos los ojos en los oculares 
9. Regular la platina hasta encontrar la imagen siempre usando el tornillo macrometrico
10. Cuando veamos la mancha mas clara mover con el tornillo micrometrico 
11. Regular los revolver

DESENFOQUE

1. Poner el eje óptico mas pequeño
2. Bajar platina con tornillo macrometrico.
3. Quitar la sustancia de la platina 
4. Limpiar el cubre objetos con alcohol
5. Bajar el reostato
6. Apagar y desenfocar
7. Poner el enfoque mas pequeño y subir la platina 

Tipos de extendido 

Permanente:

1. En el porta objetos en la parte de atrás se dibuja un circulo mas pequeño que el cubre objetos, este nos servirá para que cuando queramos ponerle el silicón no quede de fuera la muestra.
2. En la parte de adelante ponemos la muestra con ayuda de unas pinzas o de una asa de platino sin que nos salgamos de el circulo
3. La muestra debe ser demasiado fina para que así la podamos observar con mayor facilidad en el microscopio y para que en el momento de ponerle el cubre objeto no quede aire en el.
4. Ponemos silicón al rededor de la muestra y ponemos el porta objetos aplastandolo con el asa tratando de que no quede aire en el. 

Temporal: 

1. Ponemos una muestra muy pequeña y delgada en el porta objetos procurando de que sea mas pequeña la muestra que el cubre objetos.
2. en caso de que sea un extendido procurar que sea demasiado delgado y lo extendemos con el asa y en caso de que sea solido cortar una caja demasiado fina y ponerla en el portaobjetos con una pinza
3. Se coloca una gota de agua y se pone encima el cubre objetos 
4. Se lleva a observar y cundo acabemos desechar la muestra y limpiarla con alcohol.

CAPA FINA DE CEBOLLA EN EL OBJETIVO
DE 100X

FROTIS DE CREMA PODRIDA.

FROTIS DE CREMA OBSERVADO
EN EL MICROSCOPIO.

                                         

  Fig. 8. Observando frotis de espinaca con el objetivo 100x

DECANTACIÓN

El 24 de octubre, realizamos esta práctica de manera grupal así como nuestra profesora nos explico el significado de esta técnica:

Este método es utilizado para separar un sólido de grano grueso e insoluble mezclado con un líquido. Consiste en verter el componente líquido después de que se ha sedimentado el sólido. Este método también se aplica en la separación de dos líquidos que no se mezclan por sus diferentes densidades; en este caso se utiliza el embudo de separación.

MATERIALES:

• Miel, miel de maple, aceite, glicerina, agua y agua.
• Vaso de precipitado
• Agitador
• Soporte universal
• Embudo de decantación y pinza de sostén,

PROCEDIMIENTO

1. Se mezclaron todas las sustancias en el vaso de precipitado y se dejó reposar
2. Se vació la mezcla en el embudo de decantación
3. Observamos qué compuesto era más denso y separamos con ayuda de la llave que contiene el embudo.

La mezcla de agua y aceite

Se vacía la mezcla en el embudo con ayuda del agitador

Proceso de decantación

Como conclusion tenemos lo siguiente que siempre debemos de tener en cuenta  el uso correcto de diferentes instrumentos del laboratorio.

CENTRIFUGACION

La centrifugación consiste en someter la mezcla a un rápido movimiento giratorio, separando las sustancias por diferencia de densidades.

La operación se lleva a cabo por medio de un movimiento de traslación acelerado, se aumenta la fuerza gravitacional, provocando la sedimentación del sólido o de las partículas de mayor densidad. Los corpúsculos o el paquete globular de la sangre se separan por centrifugación en un suero. Algunas de sus aplicaciones industriales son:

Fabricación de azúcar. Separación de polímeros.

Separación de sustancias sólidas de la leche

Separación del plasma de la sangre. En análisis químicos y de laboratorio (sangre y orina).

MATERIALES:

• Centrífuga
• Tubos de ensaye
• Leche y sangre
• Gradilla
• Jeringa de 5ml

PROCEDIMIENTO:

1.- Se toma la muestra de sangre:

2.- Se colocan las muestras de leche y sangre en los tubos de ensaye. Deben estar a la misma altura. En nuestro caso, centrifugamos las muestras por separado. 

 Para la centrifugación de la sangre se ocupó otro tubo de ensaye con la misma cantidad de sustancia que la sangre, ya que al colocar los tubos en la centrífuga, se deben contraponer. Lo mismo que la leche:

3. Se colocaron los tubos de ensaye de forma contraponiente:

4. Se conectó la centrífuga y se programó el tiempo. Comenzamos la centrifugación en un lapso de 10min.

5. Terminado el lapso, se detuvo la centrífuga, se sacaron las muestras y observamos. Desconectamos y guardamos el equipo.

RESULTADOS

Sangre centrifugada

Leche centrifugada

CROMATOGRAFIA DE PLAYERA

La profesora nos asigno una tarea la cual consistía en pintar una playera aplicando la técnica de la cromatografia.
El proceso que realice es el siguiente:

Materiales:

• Playera
• Colorante
• Agua
• Sal
• Charola.

Procedimiento 

1. Se moja la playera tratando que quede bien mojada para después teñirla.
2. Se disuelve el colorante en un litro de agua tibia y hay agregarle 2 cucharadas de sal para fijar.
3. Se introduce la playera en el agua con colorante y se deja 15 minutos.
4. Se retira la playera después de los 15 minutos y se enjuaga hasta que el agua salga transparente.
5. se dobla la playera y se introduce en una bolsa de plástico y se dejara dentro de está durante 15 horas.

FILTRACIÓN

El dia 17 de Octubre en la segunda sesión de nuestra clase la profesora nos asigno la actividad de filtrar agua con azufre y arena.
Lo primero que hoy les dire que es la filtración para que tengan mejor conocimiento de esta:
Se denomina filtración al proceso unitario de separación de sólidos en suspensión en un líquido mediante un medio poroso, que retiene los sólidos y permite el pasaje del líquido.

Embudo con papel filtro.

El proceso realizado es el siguientes:

Materiales:
Frascos o vasos
Embudo
Papel filtro
Agua
Arena
Azufre

Poniendo la mezcla para
poder separarlos.

Procedimiento para filtrar azufre y agua:

1. Ponemos en un vaso aproximadamente una cucharada grande de azufre.
2. Añadimos agua hasta la mitad del vaso 
3. Revolvimos con el agitador hasta que las dos sustancias queden totalmente juntas
4. Previamente hacer con un papel filtro los dobleces que se indican en en la practica anterior de Filtración este lo ocuparemos para ponerlo dentro de el embudo y que se pueda filtrar la mezcla.
5. Ya con el embudo en la entrada de el vaso diluir toda la sustancia de azufre y tomar el tiempo
6. Cuando termine de caer el agua quitar el embudo y observar que tan clara estaba el agua.

Resultado de la filtración

Procedimiento realizado para filtrar agua y arena:

Mezcla de agua y arena

1. En un vaso poner aproximadamente 5 cucharadas grandes de arena
2. Añadirle al vaso agua hasta la mitad 
3. Revolverlo con un agitador hasta que las dos sustancias estén 
4. En un embudo poner el papel filtro doblado y poner el embudo en un vaso limpio
5. Diluir toda la mezcla y observar cuanto tiempo tarda
6. Cuando termine de caer el agua quitar el embudo y observar que tan clara es el agua
7. Este procedimiento desde que dejamos caer la sustancia en el embudo tardo aproximadamente 9:7 minutos.

Mezcla filtrandose

Resultado obtenido.

  

CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

El dia 17 de Octubre en nuestro laboratorio realizamos lo que es la cromatografía de columna, otro tipo de cromatografia.
Lo primero que vamos a definir es que es la cromatografia de columna:
Es una técnica de purificación, puesto que permite aislar los compuestos deseados de una mezcla.

A continuacion les mostrare todo el proceso realizado para la cromatografia:

Materiales utilizados en el proceso.

Materiales:

• Jeringa de 5ml
• Espinaca
• Hexano
• Pipeta pasteur
• Mortero con pistilo
• Sílica gel

Procedimiento realizado:

1. Triturar la espinaca (en este caso no utilizamos espinaca ya que no teníamos, así que ocupamos unas hojas verdes de un arbol de naranja) con 4ml. de Hexano y 2ml. de Etanol y extraemos la sustancia que se produjo con una pipeta de pasteur. 
2. Con un poco de algodón y una jeringa hicimos un tapón hasta el fondo de aproximadamente 1 cm.
3. También pusimos dentro de el tubo de la jeringa aproximadamente 3 cm. de silica gel.
4. Después de esto volvimos a tapar con un centímetro aproximadamente de algodón.
5. Le agregamos con una pipeta 5 ml. de alcohol y esperamos a que baje un poco para seguir echando y que no se nos derrame.
6. Con lo que extrajimos de la espinaca triturada se lo agregamos a la jeringa 
7. Lo metemos a un frasco con una tapa para que el alcohol no se evapore
8. Dejamos reposar asta que el color llegue hasta el final del tubo.

   

Triturando la espinaca.

Añadiendole alcohol.

jeringa con todas las sustancias

La dejamos reposar en el frasco hasta
que la sustancia llegara al final del tubo

CROMATOGRAFIA

El dia 13 de Octubre se vio el tema de cromatografia en el cual la profesora nos explico esta técnica, nos dijo como realizarla y nos explico conceptos relacionados con esta misma.

CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA
Materiales:

• 1 pliego de papel filtro
• 5 frascos con tapa
• Pipeta pasteur
• Tubo de ensaye
• Mortero con pistilo
• Espinaca
• Acetona, cloroformo, etanol y hexano.
• Embudo de entalle delgado.

Procedimiento:

1.-Preparar una disolución en proporcional de 2:2 de:

• Acetona y cloroformo
• Etanol y cloroformo
• Hexano y cloroformo
• Etanol y acetona

Fig 3 pusimos unas gotitas de
 la fase orgánica en los
papeles filtro

 2.- Colocar la hoja de espinaca en el mortero 

Añadir: 4 ml de Hexano y 2ml. de Etanol

Obtendremos aproximadamente 6 ml. de carotenoides y clorofila.

3.-Triturar vigorosamente y extraer la fase orgánica

• Poner la fase orgánica en un tubo ( con una pipeta de pasteur).
• Dejar reposar el tubo observar y agregar una cucharada de 1-2 gr de Na2 So2
• Agitar y dejar reposar

4.- Con el papel filtro poner dos muestras del carotenol y lo vamos a poner en los vasos con las mezclas y observamos.

Fig. 4 En cada uno de los frascos
con las mezclas pusimos los
papeles filtro tratando de que
el papel tocara la mezcla

Nota: El mejor disolvente es donde se muestra la mayor cantidad de color en la cual la mezcla haya recorrido.

Fig. 5 el mejor disolvente fue el de
acetona y cloroformo